呼吸道合胞病毒（Respiratory syncytial virus，RSV）引发的疾病具有流行性，2岁以前的婴幼儿几乎都被感染过。早产儿则容易引起严重感染，而且，这种病毒感染之后不能产生持久的免疫力所以易发生反复感染；另外，RSV也是老年人和免疫缺陷患者哮喘、肺炎、支气管炎的重要病因，随着老龄化社会的来临，因RSV感染住院的老年人数目逐年递增。

接种疫苗是重要的预防措施，世界卫生组织已将RSV疫苗定为优先发展的疫苗之一，但由于RSV具有复杂的感染机制以及免疫病理相关的安全性问题，至今尚无安全有效的疫苗上市。20世纪60年代，福尔马林灭活RSV疫苗(FI-RSV)被成功制备并用于婴幼儿的临床试验。接种的婴幼儿，当被RSV自然感染时发生了疫苗增强性肺部炎症性免疫病理反应，即与不接种疫苗的孩子相比产生了更严重的肺部感染病变，并造成两例婴幼儿死亡，死者肺部组织中检测到高滴度的RSV，大量Th2型细胞因子、单核细胞、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞浸润。阐明这种疫苗引起的更加严重的肺部感染病变的发病机制并防止其发生，是研制安全有效的疫苗的重要基础。

近年来发现缺乏TLR配体的刺激是FI-RSV疫苗增强性病理的重要原因。我们期望通过研究，能够减弱疫苗增强性病理反应。

用FI-RSV疫苗免疫野生型和MyD88-/-C57BL/6小鼠，并选用CpG2216、poly(I:C)、PamCys3和LPS四种佐剂与疫苗共同免疫野生型C57BL/6小鼠，激活不同的TLR受体，用RSV鼻腔攻击被免疫小鼠。

采用6-8周龄雌性C57BL/6小鼠48只，每组6只，随机分为8组，另设MyD88基因敲除小鼠一组，共6只。分别为：PBS组，FI-control组，FI-RSV组，FI-RSV+Al(OH)3组，FI-RSV+CpG组，FI-RSV+PamCys3组，FI-RSV+poly(I:C)组，FI-RSV+LPS组，FI-RSV+Al(OH)3 MyD88-/-组。

一共免疫两次，间隔14天。末次免疫28天后，除PBS组外，其余组用RSV感染小鼠。肺组织病理切片，HE染色，观察炎症浸润情况；PAS染色，观察气道黏液分泌情况。

PAS染色的肺组织切片显示:与PBS组相比，各免疫组被RSV攻击后均呈现不同程度的黏液分泌，FI-RSV+Al(OH)3MyD88-/-组、FI-RSV+Al(OH)3组的黏液分泌量较多，FI-RSV组、FI-RSV+CpG组黏液分泌量次之，FI-control组、FI-RSV+poly(I:C)组、FI-RSV+PamCys组黏液分泌量较少，FI-RSV+LPS组看不到黏液分泌。

HE染色的肺组织切片显示:Control组小鼠肺泡壁结构完整，肺泡周围仅存在少量炎性细胞；FI-RSV+PamCys3组、FI-RSV+poly(I:C)组和FI-control组小鼠支气管周围和肺泡间质炎性细胞增多，肺泡壁轻微增厚；FI-RSV组、FI-RSV+CpG组肺泡壁增厚，肺泡间质细胞炎性细胞较多，FI-RSV+Al(OH)3MyD88-/-组、FI-RSV+Al(OH)3组小鼠经RSV攻击后肺部气管周围浸润大量炎症细胞，肺泡壁增厚，肺泡腔减小。FI-RSV+LPS组偶见少量炎症细胞浸润肺泡间质，肺泡壁正常，支气管周围偶见少量炎症细胞。              

通过以分析，比较LPS、CpG、poly(I:C)和PamCys3四种佐剂，与正常对照组比较，LPS抑制了肺部支气管黏液的分泌，肺泡周围偶见少量炎性细胞浸润，效果较好；CpG、poly(I:C)和PamCys3三种佐剂支气管壁有少量黏液分泌，和一定量的炎性细胞浸润，对疫苗增强性疾病有一定的抑制作用。综合以上结果得出：LPS为佐剂较好地抑制了疫苗增强性病理反应，肺部感染减轻，这为RSV疫苗的研制提供了一个较好的的研究方向。

    （第一作者系沧州医学高等专科学校，高级实验师）